| 5 结果判定
取RT-PCR产物5μL，于1%琼脂糖凝胶中电泳，凝胶中含0.5μL /mL溴化乙锭，电泳缓冲液为0.5×TBE，80V 30分钟，电泳完后于长波紫外灯下观察拍照。阳性对照管和样品检测管出现251nt的特异条带判为阳性；阴性管和样品检测管未出现特异条带判为阴性。
附件5
猪瘟抗原双抗体夹心ELISA检测方法
本方法通过形成的多克隆抗体-样品-单克隆抗体夹心，并采用辣根过氧化物酶标记物检测，对外周血白细胞、全血、细胞培养物以及组织样本中的猪瘟病毒抗原进行检测的一种双抗体夹心ELISA方法。具体如下：
1 试剂盒组成
1.1 多克隆羊抗血清包被板条 8孔×12条（96孔）
1.2 CSFV阳性对照，含有防腐剂 1.5mL
1.3 CSFV阴性对照，含有防腐剂 1.5mL
1.4 100倍浓缩辣根过氧化物酶标记物（100×）
辣根过氧化物酶标记抗鼠IgG，含防腐剂 200uL
1.5 10倍浓缩样品稀释液（10×） 55mL
1.6 底物液，TMB/H2O2溶液 12mL
1.7 终止液，1M HCL（小心，强酸） 12mL
1.8 10倍浓缩洗涤液（10×） 125mL
1.9 CSFV单克隆抗体，含防腐剂(责任编辑：乐乐猪) |